大鼠notch1胞质段的克隆及其表达

notch1信号途径参与决定细胞命运，其水解后产生的活性片段——胞质段（notch1intracellularcytoplasmicdomain,nicd）能被转运进核，激活下游靶基因的表达.notch1参与细胞的增殖、分化、程序性死亡、发育过程中的形态发生和器官形成等许多重要过程.为了获得重组的nicd，以大鼠脑cdna文库为模板，用pcr方法扩增出编码nicd的基因片段，克隆至谷胱甘肽-s-转移酶（gst）融合表达载体pgex-kg中，并在大肠杆菌中获得较高水平的表达.表达的融合蛋白gst-nicd分子质量约为120ku左右，以包涵体和可溶性两种形式存在，易于亲合层析纯化.为制备抗体和进一步的功能研究奠定了基础.