人脑内一含有acp样结构域新基因的发现

为寻找脑内新基因，以正常成人全脑cdna为模板,采用锚定pcr方法进行扩增,将经琼脂糖dna电泳鉴定获得的一约1200bp大小的特异性条带回收，并克隆入teasy载体.用310geneticanalyzer进行自动测序.所得序列进行生物信息学分析：blast相似性分析结果证明所得序列为新序列，读框分析表明，该序列中存在一完整编码区，编码含357个氨基酸的蛋白质.prodom软件分析发现其含有酰基携带蛋白（acp）样结构域.随后，经3′race法克隆到该基因的全长cdna,其全长为2024bp,染色体定位在14q11.2,含有16个外显子，15个内含子，该基因已登录到genbank.经设计编码区引物，从teasy载体扩增出编码区后再克隆入pgex-4t1表达载体，经异丙基硫代-d-乳糖苷(iptg)化学诱导表达.其编码区克隆入pgex-4t1表达载体后，转入jm109宿主菌，经iptg诱导已得到表达.点杂交及rna印迹表明，该基因在正常成人脑内广泛高表达.