蛋白激酶cα对人正常肝和肝癌细胞中ha-ras基因表达的影响

运用基因转染技术，将蛋白激酶c(pkcα)cdna正向插入的真核表达重组质粒pxj41-pkcα，导入人正常肝细胞（l-02）,经蛋白质免疫印迹等检验，表明成功构建了稳定过表达pkcα的人正常肝细胞模型（lt3），用lt3和表达反义pkcα的人肝癌细胞ht6为细胞模型，通过rt-pcr，蛋白质印迹(westernblot)等分析和进一步运用自行构建的真核表达质粒prasgl3，进行荧光素酶活性检测表明：过表达pkcα可以促进l-02细胞的增殖速率，并引起ha-ras基因转录水平上升和ha-ras启动子活性升高；反之，表达反义pkcα的bel-7402细胞增殖被抑制，ha-ras基因转录水平下降，ha-ras启动子活性降低.通过实验我们首次观察到，pkcα亚类对ha-ras癌基因表达的影响与其对ha-ras启动子活性的作用有关，pkcα可能参与了对ha-ras基因表达的调控.