胶质细胞源性神经营养因子受体α1基因的克隆表达及其活性研究

为了获得重组胶质细胞源性神经营养因子受体α1（glialcellline-derivedneurotrophicfactorreceptoralpha1,gfrα1）并研究其生物学活性，从新生4天的sd大鼠海马组织中提取总rna，通过rt-pcr方法，扩增出gfrα1cdna.将gfrα1cdna克隆至含t7启动子的质粒pet-28a（+）中，构建表达质粒pet-gfrα1，转化大肠杆菌bl21（de3），获得表达菌株blgfrα1.表达菌株经1mmol/liptg诱导3～5h后，gfrα1蛋白表达，并形成包涵体.凝胶自动扫描分析表明，gfrα1表达量占全菌总蛋白的21.5%，用ni2+-nta树脂纯化和复性后，纯度达90%以上，复性的重组gfrα1蛋白可显著介导gdnf促pc12细胞的存活和分化作用.