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生物化学与生物物理进展 2002
重组人血管内皮细胞生长因子121cdna的基因克隆、表达和鉴定Keywords: vegf121,cdna克隆,毕赤酵母表达,血管生成,血管通透 Abstract: 应用rt-pcr方法，扩增人vegf121cdna基因片段，与酵母表达载体ppic9k重组，获得表达质粒p9kvegf121.该质粒转化毕赤酵母菌gs115，用g418-ypd平板筛选高拷贝转化子，pcr鉴定vegf121cdna与酵母染色体整合状态，高拷贝转化子用甲醇诱导表达.工程菌用5l发酵罐发酵,表达产物r-hvegf121占培养液中总蛋白量70%以上.纯化产物促进牛毛细血管内皮(bce)细胞增殖，并强烈促进血管通透.
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