calpain对细胞骨架蛋白tau降解作用的研究(英)

calpain是钙依赖性中性蛋白酶，根据其对钙敏感性的不同，可分为m-和μ-calpain两型.分别用不同浓度cacl2溶液孵育wistar大鼠脑皮质匀浆液，并用蛋白质印迹和定量图像分析技术检测不同亚型calpain对tau蛋白的降解作用.研究发现：在37℃用1mmol/lca2+孵育底物15min，可见tau蛋白明显降解，并在分子质量为29ku处出现tau蛋白降解片段；当ca2+浓度为5mmol/l时，tau蛋白几乎全部被降解；这种tau蛋白降解可被calpain特异性抑制剂完全逆转.进一步的研究发现，分别用μ-calpain抑制剂（0.05μmol/lcalpastatin），m-calpain抑制剂（100μmol/lcalpaininhibitorⅳ）或总calpain抑制剂（552μmol/lcalpeptin）与1mmol/lca2+共同孵育wistar大鼠脑皮质匀浆液，ca2+激活的tau蛋白降解分别被抑制8.6%，92.5%和97.8%.结果表明一定浓度的ca2+可同时激活μ-calpain和m-calpain，这两种亚型calpain均参与降解tau蛋白，但m-calpain的作用比μ-calpain更强.