对去血清后hitasy细胞分子表达及表型分析

以人血管平滑肌细胞克隆株hitasy为实验材料，探讨hitasy细胞分子表达与表型转换间的关系，为阐明血管新生内膜形成及再狭窄病理机制提供实验依据.实验表明，在含血清或去血清培养条件下，平滑肌细胞于体外发生表型转换.去血清后细胞外基质蛋白合成中止，增殖及移行能力趋于降低，细胞特异性标志物平滑肌α肌动蛋白、肌球蛋白重链及钙调结合蛋白等的表达随去血清时间延长而增加.进一步实验证实，在血管活性介质作用下，胞液钙离子浓度骤增产生膜信号级联反应，引发细胞面积减小而显示收缩功能.上述处于分化表型的细胞经补加血清后其表型特征又恢复到原有去分化型，提示体外培养人平滑肌细胞可发生表型转换.为验证去血清诱导表型转换过程中相关基因的表达变化，用差异显示pcr筛选出e1a激活基因阻遏子,在细胞处于分化表型时表达上调并对细胞增殖伴有较强抑制作用.