新型mgb探针在沙眼衣原体实时pcr检测中的应用

为建立基于taqman-mgb探针的沙眼衣原体dna荧光定量pcr检测方法，探讨其临床应用价值，用pcr法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒plvg4402464～2980nt段,并克隆入pmd18-t载体用作参比模板，设计一对引物和一个taqman-mgb探针，优化反应条件，建立沙眼衣原体dna荧光定量pcr检测系统，并运用该系统同时应用连接酶链式反应(lcr)法对临床标本进行检测.结果显示所建立的沙眼衣原体dna荧光定量pcr检测系统，最低检测限度为1dna拷贝每反应；在100～109dna拷贝每反应范围内，ct值(每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数）和dna拷贝数呈线性关系（r＞0.990）；对临床标本检测结果同lcr分析结果吻合率为100%.以上结果表明，所建立的基于taqman-mgb探针的沙眼衣原体dna荧光定量pcr检测系统具有敏感性高、特异性强和线性检测范围广等特点，适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.