嵌合重组caspase-3诱导表达促进肿瘤细胞凋亡

通过稳定转染人宫颈癌hela细胞，建立了野生型caspase-3（wt-casp3），大小亚基序列颠倒的重组caspase-3(r-casp3)，和n端融合绿脓杆菌外毒素（pe）转膜肽段的嵌合重组caspase-3(cr-casp3)的诱导表达细胞系.蜕皮素诱导后细胞中检测到目的基因的表达，mtt检测和细胞计数结果表明，r-casp3和cr-casp3诱导表达后有效地导致hela细胞死亡，通过测定细胞中caspase-3活性，以及细胞周期检测、dna梯状电泳条带检测(dnaladder)、电镜观察等证实r-casp3和cr-casp3诱导表达后细胞发生了凋亡，且二者的促凋亡活性相当，而wt-casp3诱导表达细胞并未出现上述效应.结果表明，与野生型caspase-3活化需要上游分子的切割不同，重组caspase-3具有自发的促凋亡活性，而n端pe肽段的融合不影响这种活性，因此pe转膜结构域和重组caspase-3有望参与构建能转膜进入细胞内部，并杀伤细胞的新型肿瘤治疗分子.