人类红细胞膜带3蛋白c端域lys892～phe895在cl-转运过程中作用的研究

采用酵母表面展示系统，表达带3蛋白膜段结构域(gln404～val911)至酵母细胞膜，功能研究表明，表达后的膜段结构域具有离子转运的活性，同时，带3蛋白抑制剂4,4′-二异硫氰-2,2′-二黄酸芪(dids)能够抑制其离子转运的功能.利用pcr方法，以pfast-bac-mdb3为模板扩增出带3蛋白膜段结构域的4种截断突变体，分别去除带3蛋白c端域后4个(ala908～val911)、16个(asp896～val911)、20个(lys892～val911)、32个(asn880～val911)氨基酸序列，测序后将其克隆至表达载体pyd1上，构建酵母表达质粒pyd1-trunc4、pyd1-trunc16、pyd1-trunc20和pyd1-trunc32，诱导4组突变体的蛋白质表达.然后测定cl-的转运活性，结果发现去除后20个(lys892～val911)氨基酸残基后，离子转运活性明显下降，而去除后32个(asn880～val911)后，离子转运没有进一步下降，说明lys892～phe8954个氨基酸残基在带3蛋白的离子转运过程中发挥重要作用.