|
生物化学与生物物理进展 2000
快速制备rna小分子质量标记的新方法Keywords: 锤头型核酶,自切割,体外转录,rna分子质量标记 Abstract: 在锤头型核酶下游增加一段核酶作用的靶序列,使之成为自切割的核酶.将自切割核酶基因合成,扩增并克隆在质粒pbluescriptsk上,经连续4次克隆获得含10个拷贝的自切割核酶基因的载体.5%聚丙烯酰胺变性凝胶电泳结果显示:体外转录过程中多体酶发生了自切割,核酶转录物切割成从70nt到706nt的rna等梯度带,因此,可以作为rna分子质量标记之用.
|