串联抗菌肽cecropinb基因在莱茵衣藻中的表达及其抗菌活性分析

为了应对各种抗生素在水产养殖业所带来的副作用，我们在本文中尝试利用微藻对一种抗菌肽进行表达的可行性研究．根据莱茵衣藻核基因组偏爱密码子对抗菌肽cecropinb基因进行改造，并将4个经改造的cecropinb基因依次串联起来，中间加上莱茵衣藻的自剪切连接肽序列lwmrfa，人工合成总长度为522bp的串联cecropinb基因．将串联cecropinb基因克隆到含hsp70-rbcs2启动子和rbcs2终止子的ph105载体上，再与携带ble筛选基因的表达框架连接，构建重组表达载体pcb124．采用玻璃珠转化法将载体pcb124导入莱茵衣藻cc-849中，筛选得到能表达抗菌肽cecropinb的转基因衣藻．经过6个月的保持培养后，进一步对转基因藻细胞提取液进行抗菌活性分析，发现转基因藻具有明显的抑制革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和溶壁微球菌)生长的特征．这一结果为具有抗菌活性的饵料藻的生产和应用提供了新的途径．