番茄arf2蛋白的生物信息学分析与亚细胞定位

克隆番茄(solanumlycopersicum)arf2基因，并分析其分子特性和亚细胞定位，为研究其功能提供基础．通过生物信息学方法分析slarf2基因编码蛋白的理化性质和分子特性．采用rt-pcr技术从番茄果实cdna中扩增slarf2基因全长，并构建与黄色荧光蛋白(yfp)融合的pba-arf2-yfp表达载体，进而再通过农杆菌介导的遗传转化方法，将重组质粒转化到野生型番茄中，将得到的t1代转基因种子萌发，然后取根尖通过荧光显微镜观察了融合蛋白在活细胞内分布的特点．生物信息学分析结果表明，slarf2是富含ser、leu、gly和pro以及具有arf家族典型结构域的可溶性蛋白，其氨基酸序列与葡萄、木薯和拟南芥的同源性分别为70.08%、66.94%和60.87%．经酶切和测序分析证实pba-arf2-yfp融合表达载体构建成功，此外，pcr分析表明融合蛋白在转基因植株中得到表达．经荧光显微镜观察，arf2定位在细胞核中．表明转录因子slarf2定位在细胞核中，对番茄果实发育和成熟起重要作用．