噬菌体肽库中筛选nmda受体抗原表位

为了获得人n-甲基-d-天冬氨酸受体（nr）主亚基（nr1）m3-m4环b细胞表位，以人nr1分子m3-m4环单克隆抗体mab363淘筛噬菌体展示随机12肽库，对筛选克隆进行特异性elisa检测和竞争结合实验分析.从30个克隆中得到一个阳性克隆序列“vhtnpstwqpil”（克隆1）,原核表达的nr1m3-m4环可以与克隆1竞争结合mab363.固相合成5个表位探针短肽，发现其中只有r(22)lrnpskd可以与m3-m4环竞争结合抗体，将nps三个氨基酸残基逐一敲除，缺失n或np的合成肽和m3-m4环竞争抗体的能力减弱，缺失nps的合成肽完全没有竞争能力，证明mab363的表位为nps，s可能是关键性残基.上述结论为免疫干预防治兴奋毒性脑损害策略的实施提供了一个重要线索和依据.