完整弓形虫p35重组蛋白igm-酶联免疫吸附测定法检测弓形虫急性感染

为利用重组的完整弓形虫表面抗原p35-gst蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断，构建了可表达p35-gst的jm109细胞株.采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化，用sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)和蛋白质印迹(westernblot)分析所表达的蛋白质，并用纯化的重组蛋白进行igm-酶联免疫吸附测定法(igm-elisa)检测不同病人血清中的抗-p35抗体.sds-page分析发现p35-gst重组蛋白的大小约60ku，为一亲水性蛋白，蛋白质印迹分析表明该蛋白与弓形虫阳性感染病人的血清有特异性反应.利用p35-gst为抗原，对60例血清进行igm-elisa分析，发现p35-gst可明显区分近期感染和既往感染，在弓形虫的诊断上有很大的应用前景.