cdna微阵列技术分析nag7基因对鼻咽癌细胞基因表达谱的影响

运用cdna微阵列技术分析nag7基因重表达对hne1细胞基因表达谱的影响.抽提hne1细胞和pcdna3.1(+)/nag7/hne1细胞总rna，分离polyamrna，将mrna逆转录为cdna，并在逆转录过程中用33p-datp进行标记，与含有16150个基因和表达序列标签(est)的cdna表达阵列膜杂交，获得基因表达图谱.arraygauge软件分析nag7基因的重表达所导致的鼻咽癌细胞hne1基因表达谱改变，并用rna印迹对微阵列杂交结果进行验证.结果分析表明，2倍以上的差异表达基因或est179个，其中表达上调的91个，表达下调的88个；已明确基因表达产物的上调基因29个，下调基因37个.在差异表达基因中，涉及基因转录调控、信号转导、细胞生长、细胞代谢和细胞凋亡等基因.rna印迹证实生长阻滞特异蛋白1（gas1）基因表达上调.特别值得关注的是，先前的蛋白质组研究结果亦发现nag7基因可导致生长阻滞特异蛋白1表达上调，说明gas1基因在nag7重表达的hne1细胞中具有重要作用，这为深入研究nag7基因的作用环节和机理提供了重要的线索.