拟南芥atnhx2启动子的克隆及表达模式分析(英)

atnhx2基因是拟南芥nhx基因家族的一员，编码了一种液泡膜中的na+/h+反向运输体并对拟南芥的耐盐能力起着重要的作用.采用pcr扩增的方法克隆了拟南芥atnhx2基因启始密码子上游约2.8kb的dna片段，并将其克隆到植物表达载体pcambia1301-1中，通过基因枪轰击洋葱表皮瞬时表达的方法,初步检测启动子的活性.将重组质粒pcambia1301-1/atnhx2promoter转化拟南芥并筛选纯合子.atnhx2promoter-gus分析显示atnhx2在所有的组织中均有表达,包括根尖.在保卫细胞中检测到了强烈的gus表达，这一结果表明，atnhx2对特殊细胞的ph调控和k+自身稳定方面起着重要的作用.atnhx2启动子的活性可被nacl抑制,并且抑制的强度和nacl的浓度成正相关.300mmol/lkcl处理可增强启动子的活性，说明nacl和kcl是在转录水平上调控atnhx2的表达.在老叶中gus活性比在新叶中gus活性强，这说明了atnhx2优先将有毒的离子积累在老叶中，从而有利于植物的正常发育.在根毛细胞中也观测到了强烈的gus活性，这就暗示了atnhx2在扩大的液泡中储存na+.