e1a激活基因阻遏子过表达诱导体外培养大鼠平滑肌细胞分化

为探讨e1a激活基因阻遏子蛋白(creg)对血管平滑肌细胞表型转换的调控机制，应用prc/cmv-hcreg真核表达载体转染体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(vsmcs)，观察了转染前后细胞的表型改变.结果发现，prc/cmv-hcreg质粒转染后，大鼠平滑肌细胞增殖受抑，细胞分化标志蛋白smα-actin表达显著增加.免疫共沉淀分析发现，creg与血清反应因子(srf)发生相互作用形成复合体，在creg基因过表达时，与creg结合的srf蛋白增加.凝胶迁移阻滞分析(gsma)和抗体凝胶迁移阻滞分析(supershift)显示，过表达的creg蛋白与srf蛋白共同结合到smα-actin基因启动子区carg位点上，可能参与smα-actin表达的调控.构建smα-actinpromoter-pcat？3报告基因载体并与prc/cmv-hcreg质粒共转染vsmcs也证实，creg蛋白过表达可增强smα-actin基因表达.上述研究提示,creg蛋白可能是调控vsmcs表型转换的重要分子.