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生物化学与生物物理进展 2004
e1a激活基因阻遏子过表达诱导体外培养大鼠平滑肌细胞分化Keywords: carg,阻遏蛋白,e1a,表型,细胞,血管平滑肌,大鼠 Abstract: 为探讨e1a激活基因阻遏子蛋白(creg)对血管平滑肌细胞表型转换的调控机制,应用prc/cmv-hcreg真核表达载体转染体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(vsmcs),观察了转染前后细胞的表型改变.结果发现,prc/cmv-hcreg质粒转染后,大鼠平滑肌细胞增殖受抑,细胞分化标志蛋白smα-actin表达显著增加.免疫共沉淀分析发现,creg与血清反应因子(srf)发生相互作用形成复合体,在creg基因过表达时,与creg结合的srf蛋白增加.凝胶迁移阻滞分析(gsma)和抗体凝胶迁移阻滞分析(supershift)显示,过表达的creg蛋白与srf蛋白共同结合到smα-actin基因启动子区carg位点上,可能参与smα-actin表达的调控.构建smα-actinpromoter-pcat?3报告基因载体并与prc/cmv-hcreg质粒共转染vsmcs也证实,creg蛋白过表达可增强smα-actin基因表达.上述研究提示,creg蛋白可能是调控vsmcs表型转换的重要分子.
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