选择性cox-2抑制剂celecoxib对k562细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用和分子机制

环氧化酶(cyclooxygenase,cox)家系被显示与恶性肿瘤的增殖和凋亡耐受有关，cox-2可作为恶性肿瘤治疗和预防的重要分子靶标.应用cox-2特异抑制剂——celecoxib，观察了药物对人慢性粒细胞白血病急变细胞株——k562细胞的增殖抑制和凋亡诱导效应.结果证明，celecoxib能够有效地抑制k562细胞增殖(台盼蓝染色，mtt试验及集落形成抑制试验证实)，并呈一定的剂量依赖性.celecoxib抑制k562细胞增殖的ic50为46μmol/l.通过dnaladder胶电泳和流式细胞仪检测，凋亡细胞的ao/eb染色等方法证明celecoxib能够诱导k562细胞凋亡，这一效应与caspase-3蛋白表达上调和裂解激活有关,当阻断caspase-3的活性，celecoxib诱导的k562细胞凋亡明显受抑.利用rt-pcr分析技术及蛋白质印迹，证明k562细胞存在cox-2mrna和cox-2蛋白表达；而且，k562细胞cox-2蛋白表达可被il-1β诱导性刺激，从而确认k562细胞为cox-2表达阳性细胞；celecoxib在较高浓度(80～160μmol/l)既可抑制k562细胞cox-2mrna表达，也可下调cox-2蛋白质表达，提示celecoxib抗k562白血病细胞活性与cox-2的抑制相关，其抗白血病的分子机制部分涉及到cox-2依赖性途径.