反义adipophilin寡核苷酸降低acat活性(英)

已经发现，随着细胞内胆固醇酯的积聚，adipophilin的表达明显增加.在此基础上，为了寻找adipophilin在细胞内胆固醇代谢的作用点.小鼠腹腔巨噬细胞与80mg/loxldl或80mg/loxldl加1mmol/ladipophilin反义寡核苷酸共孵育，在不同的时间点取样，使用免疫荧光染色，流式细胞仪分析和细胞内胆固醇测定.结果显示，72h后，反义寡核苷酸处理组细胞内胆固醇酯显著下降到（19.9±1.9）mg/g，油红o染色显示，该组细胞质内红色脂滴明显减少.96h的观察期间内，两组细胞adipophilin蛋白的表达量都增加.从12h开始，未用反义寡核苷酸处理组adipophilin蛋白的表达量开始大于反义寡核苷酸处理组.在96h时间点，统计学处理，未用反义寡核苷酸处理组明显高于反义寡核苷酸处理组，差别有显著性.使用ox-r［cl-3h］ldl观察两组细胞摄入oxldl的量，实验发现，两组细胞摄入ox-r［cl-3h］ldl的量逐渐增加.但是，反义寡核苷酸处理组摄入ox-r［cl-3h］ldl的量从24h后明显低于未用反义寡核苷酸处理组，在48h和96h时间点，统计学处理，两组差别有显著性.观察acat的活性发现，acat相对活性从6h到48h表现为增加，但从48h到96h，acat相对活性趋于稳定.在48h时间点，两组比较差别有显著性，反义寡核苷酸处理组的活性明显低于未用反义寡核苷酸处理组.相关分析发现，acat的活性与adipophilin蛋白的表达量有一定的联系，但不是直线相关.结果表明，adipophilin表达的高低与细胞摄入外源性脂蛋白，与acat的活性有一定的联系.提示adipophilin与脂滴的代谢功能密切相关，且acat有可能是其潜在的位点.