猪鼻支原体p37蛋白相互作用蛋白的筛选与鉴定

既往工作表明，胃癌组织中有较高的猪鼻支原体感染率，猪鼻支原体的主要膜蛋白p37能够诱导外周血单核细胞释放肿瘤坏死因子（tnf）.为了深入研究p37的作用机制，利用酵母双杂交系统筛选与p37蛋白相互作用的蛋白质分子.首先，将编码p37全长的cdna克隆到pgbkt7载体中，构建“诱饵”表达载体pgbkt7-p37，以此筛选人胎盘组织cdna表达文库.在2.6×106个克隆中，筛选到一株能与p37相互作用的阳性克隆，序列测定表明，该阳性克隆编码人视网膜色素上皮细胞蛋白（norpeg蛋白）.在此基础上经gst-pulldown实验，进一步证实norpeg蛋白确能与p37相互作用，为进一步研究p37对细胞的作用机制奠定了基础.