随机十肽库的构建及血管形成素结合肽的筛选

将合成的含有随机序列（nnk）10的寡核苷酸片段，克隆入噬菌体呈现载体噬菌粒pcantab5e的sfiⅰ，notⅰ位点，即cpⅲ蛋白信号肽与成熟肽之间，电转化e.colitg1，构建了噬菌体表面呈现的十肽库，实际库容为3.53×107，插入率为66.7%.经辅助噬菌体m13ko7超感染后，获得滴度为4.8×1011pfu/ml的噬菌体上清.经过两轮panning筛选和富集，从构建的随机十肽库中筛选到26个具有血管形成素结合活性的重组噬菌体克隆，对其中12个阳性噬菌体克隆的短肽序列进行了分析，elisa检测结果显示12个阳性噬菌体克隆都能够与血管形成素特异性结合.