三核苷酸双链重复序列扩展合成特性及其机理

简单重复序列在各种生物基因组中广泛存在，同分子进化、遗传多样性、分子标记和某些遗传性疾病等密切相关．本文以全部32种18bp三核苷酸双链重复序列作为研究对象，对它们在聚合酶作用下的扩展合成进行了系统研究．探讨了反应温度、序列本身等对扩展效率和产物长度的影响．结果显示，几乎所有的序列都能扩展变长．但序列对其扩展效率有很大影响：gc含量较多的短链，尤其是一条链中同时有g和c的短链扩展效率较高；全由ac和gt组成的双链也较易扩展．短链的最适扩展温度与短链gc组成呈一定的正相关关系．琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现，大部分产物单一性良好，且产物分子质量的大小随反应时间线性增加；随着反应温度升高，产物差异性增大．最后分析了双链重复序列的“复制滑移”扩展机理，有望为进一步研究重复序列的分子进化和基因检测中的非特异性扩增等奠定基础．