荧光偏振技术研究bloom解旋酶催化核心与双链dna的相互作用

bloom综合症(blm)解旋酶是recq家族dna解旋酶中的一个重要成员，参与了dna复制、修复、转录、重组以及端粒的维持等细胞代谢过程，在维持染色体的稳定性中具有重要的作用．blm解旋酶的突变可导致bloom综合症，患者遗传不稳定易患多种类型癌症．本研究运用荧光偏振技术研究blm解旋酶催化核心(blm642～1290)与双链dna(dsdna)的相互作用，分析其相关特征参数，了解blm642～1290解旋酶与dsdna的结合和解链特性．结果表明：blm642～1290解旋酶与dsdna的结合和解链与dsdna3′端的单链dna(ssdna)长度有关；解旋酶优先结合于dsdna底物的ssdna末端，且每分子解旋酶可结合9.6nt的ssdna；dsdna3′端ssdna的长度为9.6nt时，解旋酶的解链效率达到最大且不再随其长度而变化．另外，blm642～1290解旋酶也能够结合和解链钝末端dsdna，但其结合亲和力和解链效率低于有3′端ssdna的dsdna．推测blm642～1290解旋酶在与dsdna底物结合和解链时是单体形式，可能以尺蠖的形式解开dsdna．这些结果可为进一步研究blm解旋酶的功能特征提供理论基础．