mhc-ⅰ类肽组装复合体组分重要性的定量分析

tap2、tapasin和calreticulin(crt)是mhc-ⅰ类内源性抗原加工和递呈途径肽组装复合体(plc)中的3个重要蛋白质．虽然对于肽组装复合体及其单个蛋白组分在抗原加工递呈中的作用，国内外已有大量的研究，但是由于研究手段的缺乏，其在复合体中的相对重要性还未得到清楚和定量的分析．本文中我们建立了一种新型的抗原递送方法，利用猪链球菌溶血酶(sly)对鼠纤维母细胞系k41及其crt缺陷细胞系k42、tapasin缺陷细胞系90a及tapasin、tap2双缺陷细胞系91a进行穿孔并定量递送入鸡卵清白蛋白(ovalbumin，ova)，使其被内源性加工处理后的多肽siinfekl与小鼠h2-kb装配成复合物并被递呈至细胞表面．通过利用小鼠t杂交瘤细胞b3z和单克隆抗体25d1.16识别并检测不同细胞表面siinfekl与小鼠h2-kb复合物，我们发现crt缺陷细胞系k42的抗原提呈能力相比91a及90a，较k41有着更大幅度的下降，说明crt在提呈过程中可能有着较预期更重要的作用．本文是首个对抗原递呈途径蛋白相对重要性的研究，其研究结果对于进一步研究mhc-ⅰ类抗原加工和递呈途径相关蛋白的作用提供了理论依据与研究手段．