以中链脂肪酸受体gpr84为靶点的药物高通量筛选模型的建立和应用

g蛋白偶联受体84(gpr84)是c9-c14的中链脂肪酸受体，不仅在脂肪酸代谢和机体免疫反应中发挥着重要作用，而且与多发性硬化症、内毒素血症等炎症性免疫疾病有着密切联系．因此，找到以gpr84为靶点的配体，可能为治疗这些疾病提供一种有效的方法．构建稳定过表达gpr84受体蛋白的细胞系，为筛选gpr84为靶点的配体和研究这些免疫疾病提供了重要途径．本文将含gpr84和gα16基因质粒共转染到hek293细胞中，经过抗生素抗性筛选，挑取稳定表达gpr84蛋白的hek293细胞系．用rt-pcr、免疫荧光染色等实验方法检测了gpr84基因和其编码受体蛋白的表达；用钙流实验、环腺苷酸实验、蛋白质印迹分析、流式细胞分析证实了表达的gpr84具有完整的生物学活性，并利用该细胞系进行了药物高通量筛选，得到了新的gpr84拮抗剂，为进一步阐明gpr84的生物学功能，研究并治疗与其相关免疫疾病奠定了基础．