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水产学报 2003
鳗源嗜水气单胞菌β—溶血素基因的克隆及表达Keywords: 鳗源嗜水气单胞菌,β－溶血素,基因克隆,基因表达,疫苗,鱼类,暴发性疾病,致病菌 Abstract: 应用pcr技术,从1株鳗源嗜水气单胞菌ml316中扩增得到β-溶血素基因ahl316hem,将ahl316hem克隆到pgem-teasyvector,经分析验证后重组到pcdna3.0中,构建了重组质粒pdlh.转化重组质粒pdlh的大肠杆菌(escherichiacoli)dh5α能在血琼脂培养皿中形成明显的β-溶血斑,重组菌纯化的胞外产物溶血价为1.28×104hu@mg-1,同时重组菌的胞外产物能被原始菌株的高免血清特异性地识别.结果证实,克隆到鳗源嗜水气单胞菌β-溶血素基因,重组质粒pdlh能够表达具有天然生物学活性的β-溶血素,为构建嗜水气单胞菌核酸疫苗奠定了基础.
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