斑点叉尾鮰病毒囊膜蛋白orf6在昆虫细胞中的表达

为构建基于杆状病毒表达系统的ccv新型亚单位疫苗,将ccv的囊膜蛋白基因orf6克隆至杆状病毒转座载体pfastbactm-1质粒中,并将阳性重组转座质粒转化进含穿梭载体bacmid的感受态细胞dh10bac中,获得重组子rbacmid-orf6。在脂质体介导下将该重组子转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒ac-orf6。ac-orf6感染的sf9昆虫细胞,经超薄切片电镜观察,可见重组杆状病毒呈多粒包埋,经间接免疫荧光、western-blotting检测,ccv的orf6蛋白可以在感染了ac-orf6的sf9细胞中表达。研究表明,获得了插入orf6基因的重组杆状病毒,并且该基因可以在重组杆状病毒介导下在昆虫细胞中表达,从而为基于ccvorf6的杆状病毒亚单位疫苗研究奠定了基础。