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水产学报 2010
中华鳖myd88部分序列克隆及其在组织中的表达差异分析DOI: 10.3724/SP.J.1231.2010.06905, PP. 1018-1024 Keywords: 中华鳖,髓样分化因子88,tir结构域,组织表达,嗜水气单胞菌,脂多糖 Abstract: myd88(myeloiddifferentiationfactor88,myd88)是多数tlrs(tolllikereceptor,tlrs)信号转导过程中的关键接头分子。研究根据myd88(myeloiddifferentiationfactor88,myd88)tir结构域(toll-like/il-1receptordomain)保守区设计简并引物,通过pcr扩增,成功地从中华鳖脾脏cdna中扩增出351bp的目标序列。测序后经结构域和序列比较分析,扩增片段为中华鳖的myd88-tir结构域。该序列与大黄鱼、鸡等脊椎动物的myd88的tir结构域序列同源性和相似性分别为72.9%~86%和77.6%~83.6%。以热灭活嗜水气单胞菌刺激中华鳖后,经荧光定量pcr检测,在48h内,肝、脾和肾组织中myd88mrna相对表达量均出现不同程度的增加,尤以脾脏中的增幅最为明显,为对照组的6.89倍;中华鳖心脏成纤维样细胞经20nglps刺激后1~8h,myd88表达量有所提高,24h的表达量最高。该研究结果将为开展中华鳖天然免疫奠定良好基础。
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