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水产学报 2005
海带雄性配子体差异表达基因片段的克隆及筛选Keywords: 海带,差异表达基因,抑制消减杂交,cdna消减文库,雄配子体 Abstract: 利用抑制消减杂交法(suppressionsubtractivehybridization,ssh)获得了海带雌、雄配子体差异表达的cdna片段,将雄配子体差异表达的cdna片段克隆于pgem-t载体并转化大肠杆菌(escherichiacoli)jm109,构建雄配子体差异表达的cdna消减文库.自750个阳性克隆中随机挑选100个进行pcr扩增鉴定,电泳图谱表明插入片段大小在200～1000bp之间.进一步经过southern斑点杂交筛选后,选取10个阳性克隆进行测序和序列分析,有7个片段与genbank数据库中已知基因序列无明显同源性,初步判断为新的基因序列,3个片段与已知fcp基因和lhcf6基因的同源性分别达到88%和98%.
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