雌核发育二倍体鲫鲤及其他倍性鱼cdc2基因cdna全序列克隆及表达分析

为研究雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子的分子机制，实验采用pcr和cdna末端快速分离法，克隆获得了雌核发育二倍体鲫鲤（g3）、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的细胞周期相关基因cdc2基因cdna全序列。结果显示这四种不同倍性鱼cdc2基因均编码含有302个氨基酸蛋白，而且编码的蛋白都含有与其他cdk激酶相当保守的序列pstavre；同源性分析发现这四种鱼cdc2基因编码的氨基酸序列之间的相似度大于97.6﹪，说明cdc2蛋白在这四种不同倍性鱼具有高度保守性。采用实时荧光定量pcr（real-timepcr）对cdc2基因在雌核发育二倍体鲫鲤（g3），二倍体红鲫，三倍体湘云鲫，四倍体鲫鲤早期卵巢中的表达进行分析，结果发现雌核发育二倍体鲫鲤（g3）cdc2基因比普通二倍体红鲫和三倍体湘云鲫表达要高，比四倍体鲫鲤的表达水平低。该研究从分子水平证明了g3早期性腺中存在着大量的多倍体卵原细胞。同时，研究表明cdc2基因在雌核发育二倍体鲫鲤早期卵巢的高表达暗示着g3多次进入s期却不经历m期导致二倍体配子的产生。