泥蚶乙二醛酶ⅰ基因的克隆及时空表达特征分析

为探索贝类乙二醛酶ⅰ基因的结构及功能特征，实验利用race技术首次克隆获得泥蚶乙二醛ⅰ基因（tg-gloi）的cdna全长序列，并对其氨基酸序列特征及时空表达特征进行了研究。结果发现，tg-gloi基因的cdna全长序列为1807bp，开放阅读框为540bp，编码180个氨基酸，在27～169aa处具有典型的乙二醛酶系保守序列；成熟的乙二醛酶ⅰ由2个相同的亚基组成，每个亚基由乙二醛ⅰ基因编码，其二级结构由18个α-螺旋、20个β-折叠片和36个转角组成，每个亚基各含1个zn2+；氨基酸序列比对发现，tg-gloi氨基酸序列与太平洋牡蛎的同源性达到86.1%，与其他脊椎动物的同源性也都在70%以上，表现出高度保守性。qrt-pcr结果显示，tg-gloi基因在泥蚶成贝8个组织中均有表达，在内脏团中的表达量最高，极显著地高于其他组织（p<0.01）；在各发育时期中，tg-gloi表达量随发育进程呈逐渐升高的趋势，在眼点幼虫期达到最高，极显著高于其他时期（p<0.01），而在幼虫变态至稚贝时，表达量又极显著地下降（p<0.01）。研究表明，tg-gloi具有类似于高等动物的分子结构，并在泥蚶不同组织、不同发育时期表达差异显著，这为进一步研究该酶在贝类中的功能和作用机制奠定了重要基础。