泥蚶基质金属蛋白酶组织抑制因子3基因的克隆及镉免疫表达研究

通过已构建的泥蚶转录组文库est,利用smartrace技术扩增得到泥蚶tg-timp-3基因全长cdna序列,并对其进行生物信息学和组织表达相关分析。结果显示,泥蚶tg-timp-3cdna全长为804bp,其中开放阅读框为570bp,编码189个氨基酸;氨基酸序列比对发现其氨基酸序列与其他动物的相似性并不高,与长牡蛎的相似性仅为35.8%,但timp基因的两个功能域(n端和c端)相对保守。qrt-pcr检测结果显示:tg-timp-3mrna在鳃中表达最高,外套膜和肝胰腺次之,表达量最低的是血液。在不同浓度重金属镉(cd)攻毒后,泥蚶鳃中的tg-timp-3mrna表达量先略微下调后显著上调达到最高,其中25μg/l和250μg/l镉攻毒后在6h时表达量达到最高(p<0.01),500μg/l镉攻毒后在9h时表达量达到最高,48h后各浓度组tg-timp-3基因表达受到不同程度抑制。研究表明,tg-timp-3对重金属cd免疫防御或解毒中可能起重要作用,而泥蚶鳃组织中的tg-timp-3mrna表达对不同浓度cd的抗逆免疫反应的灵敏度和时序上存在一定差异。