斜带石斑鱼igm、igz和igd重链基因的克隆

应用race方法获得斜带石斑鱼膜结合型免疫球蛋白m(membrane-boundimmunoglobulinm,migm),膜结合型免疫球蛋白d(migd),分泌型免疫球蛋白z(secretedsecretoryimmunoglobulinz,migzsigz)的重链基因。斜带石斑鱼膜结合型igm重链恒定区包含3个恒定区结构域(μ1,μ2,μ3)以及两个跨膜外显子(tm1,tm2),tm1外显子与μ3结构域末端相连接。氨基酸序列相似性分析结果显示,斜带石斑鱼migm各恒定区与牙鲆migm恒定区相似性最高,为在53%~78%之间。migd的cdna全长为3375bp,开放阅读框包含3006bp，其恒定区由1个μ1外显子,7个δ外显子以及跨膜区组成。斜带石斑鱼igd恒定区与鳜igd各恒定区氨基酸序列相似性最高,δ1-~δ7的相似性分别为75.5%、75.8%、65.4%、76.6%、88.1%、90.6%、82.8%,tm结构域为82.7%。分泌型sigz的基因结构与其他硬骨鱼类sigz的结构相似,包括4个外显子和3个内含子,内含子长度分别为222、129和458bp。利用半定量pcr分别检测了这3种基因在斜带石斑鱼各器官/组织中的表达,发现migm在头肾、肾脏、脑、脾脏、肠、鳃、心脏和胸腺中均有表达;migd的mrna在头肾、肾脏以及胸腺中有较高的表达,在肠中表达量较低;sigzmrna主要分布于淋巴组织如头肾、肾及脾脏中,而在鳃、心脏和胸腺中的丰度较低。