西伯利亚鲟海豚链球菌的分离鉴定及毒力基因检测

2013年8—9月,四川雅安汉源湖养殖的西伯利亚鲟发生一种以体表溃疡、内脏出血和心外膜囊肿为特征的传染病.为明确其病因,本研究从自然发病鱼的肝、脾和肾进行了病原菌的分离、人工感染、分离菌的表型特征和分子生物学特征的检测.结果从患病鱼体内分离到一株g+链状球菌(ab130920),人工感染实验证实了其病原性,生理生化特性与海豚链球菌(atcc29178)基本一致;16srdna序列(genbank登录号:kj162337)与genbank中s.iniae16srdna序列同源性最高,在以16srdna序列及其genbank中同源性较高的相关序列构建的系统发育树上,分离菌与海豚链球菌聚为一支;同时,在基于s.iniaelcto基因的特异性pcr检测中,从分离株基因组dna扩增出预期大小的870bp条带,进而鉴定分离菌ab130920为s.iniae.在对cpsd、sima、saga、pdi和scpi等5种s.iniae毒力基因的多重pcr检测中,分离菌均扩增出相应大小的特异性片段,表明其为一毒力较强的菌株,与人工感染实验的高致病性结果相佐证;药物敏感性检测发现其对阿莫西林、强力霉素、氟苯尼考等抗菌药物敏感,但对新生霉素、利福平、氧氟沙星耐药.