坛紫菜两种小分子热激蛋白(shsp)基因的克隆及表达特征分析

小分子热激蛋白(shsp)不仅在应激条件下高效表达,还在正常状态的细胞中广泛存在,参与一些重要细胞生理活动的调节。为研究坛紫菜应答高温和失水等逆境胁迫的分子机制,本研究以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础,采用race或直接pcr扩增,克隆获得了坛紫菜2种shsp的全长基因:phhsp22和phdnaj。序列分析结果表明,phhsp22序列全长857bp,包含一个519bp的开放阅读框,所编码的多肽包含172个氨基酸,分子量为19.1ku,等电点为5.24(收录号:km102540);phdnaj序列全长1616bp,包含一个1290bp的开放阅读框,所编码的多肽包含429个氨基酸,分子量为46.1ku,等电点为6.43,属于hsp40亚家族(收录号:km102541)。基因表达水平的定量分析结果表明,两个基因在高温胁迫不同时间水平和不同失水胁迫程度下的表达均呈现出一致的表达模式,即在胁迫初期表达水平显著上调,但随着胁迫的持续,这两个基因的表达水平开始逐渐下调。结果表明,这2个基因在逆境胁迫下的表达可能存在一个反馈调节机制。