拟穴青蟹grp78基因的克隆与应激表达

葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulatedprotein78ku,grp78)是热休克蛋白70家族成员之一,在调节蛋白质折叠和维持内质网稳态过程中起着分子伴侣作用。采用rt-pcr、race等技术,首次从拟穴青蟹获得了grp78的cdna全长序列。该序列全长2284bp,开放阅读框(orf)为1962bp,编码653个氨基酸残基。同源分析显示,该基因编码的蛋白含有hsp70家族的签名序列,c末端为内质网蛋白滞留信号kdel,与其他物种具有很高相似性。实时荧光定量pcr结果表明,grp78基因在拟穴青蟹多个组织中均有表达。第一期仔蟹在不同的温度和盐度下暴露12h后,grp78基因表达量随环境温度升高而增加;在高盐(30)条件下grp78表达量较高,进而推测拟穴青蟹grp78参与蛋白质折叠和环境胁迫的应答。