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ISSN: 2333-9721
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水产学报  2010 

坛紫菜叶状体rna提取方法的改良与比较

DOI: 10.3724/SP.J.1231.2010.06512, PP. 220-226

Keywords: 坛紫菜,叶状体,rna提取,rt-pcr

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Abstract:

为提取高质量的坛紫菜叶状体总rna,对常用的几种植物rna提取方法(ctab法、sds法、异硫氰酸胍法)按照去除多糖、多酚的方法进行了改良,并对分离的总rna根据吸光值、电泳图谱及rt-pcr检测等结果与两种试剂盒(离心柱试剂盒法,rnaiso法)的提取结果进行了比较。结果表明,sds法、异硫氰酸胍法和rnaiso法3种方法提取的rna纯度低,质量差,部分rna已经发生了降解。而改良ctab法和离心柱试剂盒法提取的总rna质量可靠,完整性好,纯度高,并且成功去除了可能影响逆转录酶活性的物质,可以进一步应用于cdna文库构建,基因表达分析等后续实验,但这两种方法各有优缺点,应根据实际情况选用合适方法进行坛紫菜叶状体总rna的分离。

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