瓦氏黄颡鱼卵黄脂磷蛋白(lv)的纯化、性质鉴定及其抗血清的研制

采用凝胶过滤和离子交换两种层析技术，从瓦氏黄颡鱼ⅳ期卵巢粗提液中分离、纯化出卵黄脂磷蛋白（lv），采用糖、磷、脂蛋白染色技术验证分离、纯化的蛋白为lv，该lv在非变性条件下分子量约为230ku，在sds变性条件下分子量约为106ku。纯化的瓦氏黄颡鱼lv经检测显示含有类胡萝卜素，但没有二硫键，对热相对稳定。利用纯化的瓦氏黄颡鱼lv，制备了兔抗瓦氏黄颡鱼lv多克隆抗血清。通过双向免疫扩散法测得lv抗血清的效价为1∶32，还发现瓦氏黄颡鱼卵黄蛋白原（vtg）和lv之间有明显的免疫交叉反应性，说明两者具有相同的免疫原性；western-blotting检测显示抗血清的特异性较好，并能特异性地识别vtg。