奥尔森帕金虫环介导等温扩增(lamp)检测方法的建立及应用

奥尔森帕金虫是重要的贝类病原性寄生虫之一,为建立快速、灵敏、准确和使用简便的检测方法,实验根据奥尔森帕金虫5.8srdna中的内转录间隔区(internaltranscribedspacer,its)序列,建立了环介导等温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,lamp)检测方法,并对反应温度、反应体系中mg2+浓度和反应时间进行了优化。该方法的检测灵敏度约为30拷贝质粒dna,并且特异性较强,与海水帕金虫、包纳米虫、波豆虫及急性病毒性坏死病毒(acuteviralnecrosisvirus,avnv)等病原均无交叉反应。使用lamp法对两批菲律宾蛤仔样品进行检测,结果表明,lamp检测与传统pcr检测相比,灵敏度更高,检测结果更准确。实验所建立的奥尔森帕金虫lamp检测方法简单、快速、灵敏且特异性强,可以在沿海贝类养殖厂及条件简陋的实验室使用。