拟穴青蟹14-3-3基因全长cdna的克隆及组织表达分析

采用rt-pcr及race技术,从拟穴青蟹眼柄组织中克隆获得14-3-3基因cdna全序列。序列分析结果表明：拟穴青蟹14-3-3基因全长1112bp,开放阅读框长744bp,编码由247个氨基酸组成的蛋白,分子量为28.086ku,等电点为4.675。与其他物种14-3-3基因氨基酸序列进行同源性比较分析显示,拟穴青蟹14-3-3基因与斑节对虾14-3-3基因同源性最高(95%),依次为墨吉对虾(93%)、苜蓿切叶蜂(92%)。聚类分析表明,拟穴青蟹14-3-3基因氨基酸序列与斑节对虾、墨吉对虾紧密聚为一支。经荧光定量检测,拟穴青蟹14-3-3基因在肝胰腺和肌肉中的表达量较高,其次为鳃、眼柄、心脏和肠,在胃中表达最少。盐度骤变实验结果表明：盐度胁迫24h后,盐度的下降(5)或者上升(15、20、25、30)都引起了14-3-3基因在鳃中的表达量极显著上升(p<0.01),盐度变化的幅度越大,14-3-3基因的表达量越多。实验结果为进一步深入研究14-3-3基因的功能及调控机理奠定基础。