军曹鱼igμ重链的全长克隆及在各组织中的定量分析

采用同源克隆和race技术,克隆了军曹鱼igμ重链的cdna全序列,并通过荧光定量技术分析其在组织中的表达。军曹鱼igμ的cdna全长1933bp,3￠的非编码区域(utr)为164bp,5￠utr为26bp,开放阅读框为1743bp,编码580个氨基酸,分子量为64.831ku,理论等电点6.6。推测的军曹鱼igμ全长氨基酸序列与已报道的鱼类的相似性最高为60%,最低为30%,同两栖类的相似度在30%~33%,同其他高等的动物相似度不足30%。较保守的ch4区和鱼类相似性在64%~71%,同其他生物的相似度仅为31%~33%,具有较强的物种特异性。军曹鱼igμ中存在半胱氨酸和色氨酸的保守位点以及fr2骨架区的gkglew和在fr3的yycar保守序列。igμ链基因在健康鱼体中除了肾以外在其它各组织中均有表达,在肠中的表达量最高。经鲨鱼弧菌刺激48、96、192h后,在采样的各个组织中均有表达,心脏、鳃、肠道在刺激后48h表达量明显增加,脾脏、胃和脑0h时的表达量较高,肝脏、头肾以及肾脏192h后表达较显著。从时间上看,黏膜免疫屏障最先抵御外来抗原,其后，依次是肝脏、肾、头肾产生免疫应答,说明系统免疫在长时间的抵御外来抗原时发挥着重要作用。