异育银鲫p450家族cyp3a136基因的克隆与表达

根据5种硬骨鱼已知cyp3a序列保守区设计兼并引物,以异育银鲫cdna为模板扩增得到cyp3a基因片段,根据得到片段序列设计特异引物并利用cdna末端快速扩增技术(race)获得全长cdna。得到异育银鲫cyp3a基因全长为1769bp,开放阅读框为1545个核苷酸,编码514个氨基酸。其预测蛋白质分子量为58.624ku,理论等电点为6.30。将异育银鲫cyp3a序列理论编码氨基酸序列提交细胞色素p450命名委员会(cytochromep450nomenclaturecommittee)并由其命名为cyp3a136。氨基酸序列分析显示,其与稀有鮈鲫、草鱼、鲦同源性较高,并且具有高度保守的血红素结合区域fxxgxxxcxg。异育银鲫cyp3a基因的半定量rt-pcr显示,在肝和肠组织中转录水平最高,在肾和鳃中次之,其余组织较低。