鳜t细胞表面受体cd4分子的克隆与表达分析

克隆了鳜t细胞表面受体cd4分子的cdna序列并对其在组织/器官的表达进行了分析。鳜cd4分子的cdna序列全长为2356bp,编码469个氨基酸。该cd4分子由4个免疫球蛋白样结构域(v1c1v2c2)构成的胞外区、一个跨膜区和一个包含保守的cxc基序的胞内区组成。系统进化分析表明,鳜cd4分子与同属于鲈形目的鲈cd4分子聚为一支,与鲈的相似性最高(57%),与鲤的相似性较低(34%)。序列比对分析显示,cd4分子胞外区存在多个保守性位点,如:c1结构域中的wtc基序、v2和c2结构域中的n糖基化位点等。同鸟类和哺乳类不同的是,鳜cd4分子在v1结构域中缺少由半胱氨酸(cys)残基对形成的二硫键,而在v2结构域中存在一个额外的二硫键,这可能会改变cd4分子的空间构象,进而影响到cd4与mhcⅱ的结合以及后续的抗原诱导的t细胞活化等。荧光定量pcr分析表明,cd4mrna在鳜的胸腺中表达量最高,在脾脏中表达量最低。脂多糖腹腔注射8h后,cd4mrna在鳜的胸腺、脾脏和头肾中都呈显著的上调表达(p<0.05)。