鳜胃蛋白酶原a、胃质子泵基因cdna全长的克隆与细胞表达定位

利用cdna末端快速扩增(race)技术获得了鳜全长1322bp的胃蛋白酶原(pepsinogen,pg)a2cdna序列,含1131bp的开放阅读框(orf),共编码376个氨基酸,氨基酸序列包含信号肽、激活肽和胃蛋白酶3部分,胃蛋白酶部分含有2个天冬氨酸活性位点和3个二硫键。鳜胃蛋白酶a2与a1在序列组成、理化性质、功能位点、空间结构上存在明显差异,表明它们可能具有不同的催化功能。胃质子泵(gastrich+/k+-atpase)是胃酸分泌的关键性酶,研究克隆获得了鳜全长3581bp和1669bp的胃质子泵α、β亚基cdna序列。序列相似性分析显示,胃质子泵α亚基具有高度保守性,含多个功能位点,而β亚基具有相对可变性。原位杂交(insituhybridization,ish)结果显示,鳜pga1、pga2和胃质子泵α亚基mrna均在胃腺的同一类型细胞中表达,该细胞兼有分泌pg和胃酸的功能,鳜胃腺分泌细胞属于泌酸胃酶细胞。