黄姑鱼精子的超低温冻存及细胞结构损伤的检测

以hbss溶液为稀释液,dmso为抗冻剂,0.25ml麦细管为冻存管,两步降温法超低温冻存黄姑鱼精子,并用单细胞凝胶电泳(scge)技术检测了冻精的dna损伤,荧光双染色流式细胞仪技术(fcm)检测了冻精的细胞膜性结构损伤。结果表明,dmso质量分数在5%~20%时,冻精的活力与鲜精相比无显著差异;其中dmso质量分数在10%时,冻精的激活率、运动时间及寿命分别为85.25%±3.95%、(3.23±0.27)min及(3.83±0.33)min。dmso质量分数在25%、30%时,冻精的活力显著下降。scge检测显示,dmso质量分数在5%~15%时、冻精的dna损伤与鲜精相比差异不显著,dmso质量分数为20%、25%、30%时,冻精的dna损伤明显加重,冻精的dna损伤与抗冻剂dmso的质量分数成正相关。fcm检测显示,dmso质量分数在5%~20%时,冻精中线粒体及细胞膜结构保持完整性的精子比例与鲜精相比无显著差异,dmso质量分数在25%、30%时,冻精中的线粒体及细胞膜结构保持完整性的精子比例明显下降。分析认为,较高质量分数的dmso是引起冻精活力下降,dna、线粒体及细胞膜结构损伤加重的主要原因。