镉诱导鲫肝细胞内ca2+-atp酶与金属硫蛋白的表达

研究了镉诱发鲫肝细胞相关的胞内游离钙离子变化,以及ca2+-atp酶及金属硫蛋白表达量的变化。试验分为对照组、5、10、15、20μmol/lcdcl25个组。ca2+用fura-2/am方法检测,试验后24h用荧光倒置显微镜观察细胞内游离钙离子变化;分光光度法检测ca2+-atp酶;石墨炉—原子分光光度法检测了细胞内镉离子浓度;免疫酶联法(elisa)检测了金属硫蛋白(mt)含量。结果显示,镉可导致细胞存活率下降,具有一定的毒性。镉离子引起胞内ca2+荧光强度和ca2+-atp酶活性增加(p＜0.01)。随镉浓度升高,处理组ca2+-atp酶浓度活性分别是对照组的4.52、6.73、6.68、7.19、6.18倍;暴露24h后各组细胞内镉离子均有上升,其中5μmol/l组最高,达(2.045±0.322)μmol/l;各处理组金属硫蛋白(mt)含量增高(p＜0.01),且5μmol/l低浓度组mt增幅最大,达17.15%。结果提示,镉诱导下细胞内ca2+升高,mt表达量上升,且mt可螯合进入细胞内的镉离子,这种螯合可能是降低镉毒理作用的机制之一。