浒苔中mnsod和cat基因克隆和表达分析

实验以大型绿藻浒苔为材料,克隆了其抗氧化系统关键酶锰超氧化物歧化酶(manganesesuperoxidedismutase,mnsod)和过氧化氢酶(catalase,cat)基因的部分片段,利用荧光定量pcr技术研究了mnsod和cat对温度和水杨酸作用的响应规律。结果获得浒苔318bp的mnsod基因,该mnsod推测的氨基酸序列与裂片石莼mnsod相似性最高为89%;获得了229bp的cat基因,该浒苔cat编码氨基酸序列与裂片石莼和雨生红球藻cat序列相似性分别为99%和93%。在利用mnsod和cat氨基酸序列构建的系统树中,浒苔均先与裂片石莼聚类,再与其他绿藻聚在一起。不同温度对浒苔mnsod和cat基因表达影响表明,35℃高温培养对浒苔mnsod和cat基因表达影响最显著,其表达量分别为25℃培养的2.18倍和2.05倍;5℃低温培养次之;而15℃与25℃培养对mnsod和cat基因表达影响差异不显著(p>0.05)。在高温35℃下,添加0.1mmol/l水杨酸后mnsod和cat基因表达量分别为各自对照的2.08倍和5.30倍,而0.01mmol/l水杨酸添加后基因表达与对照差异不显著(p>0.05)。研究表明,mnsod和cat基因表达的增强不仅是浒苔对高温胁迫的响应,而且也是水杨酸缓解高温对浒苔不利影响的方式之一。