草鱼bcl-2基因的克隆、组织表达分析及dha诱导下其在脂肪细胞中的表达变化

为获知草鱼b细胞淋巴瘤-2(bcellcll/lymphoma-2,bcl-2)基因序列及其在草鱼各组织和脂肪细胞中的表达情况,采用cdna快速末端扩增技术获得了草鱼bcl-2的全长cdna序列,通过实时定量pcr研究了bcl-2在草鱼不同组织中的表达水平及经二十二碳六烯酸(docosahexaenoicacid,dha)处理后,草鱼脂肪细胞bcl-2的表达变化。结果显示,所获得草鱼bcl-2基因全长cdna序列长度为1292bp,包含133bp的5′非翻译区和784bp的3′非翻译区;开放阅读框为375bp,编码124个氨基酸。草鱼bcl-2与鲤、斑马鱼bcl-2氨基酸同源性分别为89.5%和91.1%,与人、原鸡、小鼠、野猪、欧洲牛、褐家鼠、家猫和犬等其他动物的氨基酸同源性为57.7%～62.0%。其编码蛋白的分子量为14.14ku,等电点为4.68。bcl-2基因在草鱼心脏、肝胰脏、脾脏、鳃、肾脏、肌肉、腹腔脂肪组织、脑、肠和精巢10个组织中均有表达,其中在腹腔脂肪组织、肾脏和精巢中表达丰度最高,在肌肉中表达最低。dha处理草鱼前体脂肪细胞后,bcl-2基因表达在增殖阶段下调,而在分化阶段上调。研究表明,bcl-2在草鱼各组织中广泛表达,且dha对其在脂肪细胞中的表达具有调控作用。