哈维氏弧菌浸浴后凡纳滨对虾肠道组织病理变化及转录水平的免疫应答

为研究凡纳滨对虾在不同浓度哈维氏弧菌的浸浴攻毒作用下肠道损伤的动态发展过程及肠道免疫基因表达水平,采用组织切片探究对虾肠道组织形态,采用实时荧光定量pcr测定抗脂多糖因子基因(alf)、对虾素基因(pen-4c)和crustin基因(cru)以及溶菌酶基因(lzm)、脂肪酸结合蛋白基因(fabp)的表达水平变化,并对肠道及水体中的弧菌数目进行监测。结果表明,哈维氏弧菌侵染后,在低浓度组侵染32h、中浓度组侵染16h及高浓度组侵染8h后出现轻度感染,在低、中浓度组侵染40h后及高浓度组侵染16h后发生重度感染。cru在低、中浓度组侵染24h和高浓度组侵染16～24h出现显著表达;alf在低浓度组侵染24h,中浓度组侵染8和16h,高浓度组侵染16h显著上升后;pen-4c在中、低浓度组侵染8h,高浓度组侵染8～16h达到其表达量最大值;lzm在低浓度组侵染24h,中、高浓度组侵染8h有显著提高。攻毒后,3种攻毒剂量下弧菌数目均处下降趋势,弧菌在侵染0～8h经口大量进入对虾肠道,至侵染32h菌数回落。结论:随着弧菌浓度的提高和攻毒时间的延长,中肠组织损伤情况逐渐加重,上皮细胞形态改变直至溃散,黏膜褶皱形态发生皱缩及脱落,肌层发生损伤。肠道受到哈维氏弧菌侵染后,抗菌肽alf、pen-4c、cru基因及lzm基因表达量迅速上调,能够及时做出免疫应答反应,从而阻止致病菌的侵染;fabp表达量未显著增加。